Құтыру - 100% өлімге әкелетін ең қауіпті вирустық инфекция. Қазіргі уақытта тиімді емдеу әдісі жоқ. Қазақстанда құтыру проблемасы шешілмеген күйінде қалып отыр, аурудың табиғи ошақтары үнемі тіркеліп отырады, бұл құтырудың алдын алу және онымен күресу бойынша неғұрлым тиімді шараларды қажет етеді.

Құтыруды емдеудің жалғыз әдісі - вакциналармен және құтыру иммуноглобулинімен (RIG) арнайы профилактиканы қолдану. RIG жылқы немесе адам плазмасынан алынған. Екі өнімде де қауіпсіздік, жеткізу және құны бойынша бірнеше шектеулер бар. Сондықтан құтыру вирусымен күресудің жаңа инновациялық және арзан құралдарын алу – маңызды мәселе болып табылады.

Жобаның мақсаты:

Құтыру вирусын эффективті бейтараптандыратын жаңа наноантиденелерді жасау. Иммундық талдауларда Құтыру вирусын жылдам анықтауға арналған наноантиденелерге негізделген жоғары спецификалық және сезімтал зондтты құрастыру.

Жобаның міндеттері:

1. Құтыру вирусының G-белогын кеңісткте дұрыс қатпарланған рекомбинантты белок ретінде экспрессиялау және экспрессия өнімінің антигенділігін бағалау.

2. Фагты дисплей әдісі және RABV-G-спецификалығы бойынша наноантиденелерді таңдау арқылы VHH cDNA кітапханасын (наноантиденелер) құру.

3. Моно-, би- және тривалентті RABV-спецификалық наноантиденелердің бейтарапттандыру эфективтілігін, Құтыру вирусының өлімге әкелетін дозасымен жұқтырған тышқандар моделінде зерттеу.

Алынған нәтижелер:

Адамның құтыруы Қазақстан халқының денсаулығына үлкен қауіп төндіреді, аурудың табиғи ошақтары үнемі тіркеліп отырады, бұл құтырудың алдын алу және күресу шараларының тиімділігін арттыруды талап етеді. Бұл жоба үлкен сұранысқа ие, құтыру вирусын тиімді бейтараптандыру үшін жаңа наноблоктарды жасауға бағытталған.

Бұл жобада кері транскрипция және ПТР әдістерін қолдану арқылы түйелердің қан сарысуынан құтыру вирусына қарсы арнайы наноантиденелер бөлініп алынды. Құтыру вирусын тиімді бейтараптандыруға ықпал ететін наноантиденелердің әртүрлі формалары жасалды. Құтыру вирусының рекомбинантты гликопротеині (G-белок) бактериялық және ашытқы жүйелерінде клондалған және экспрессияланған. Сілтілік фосфатазасы бар арнайы нанодене құрылды, бұл иммундық ферментті талдау арқылы үлгілерде құтыру вирусын анықтау процесін жеделдетуге мүмкіндік береді.

Осылайша, құтыру вирусына қарсы спецификалық наноблоктарды жасау қолда бар вакциналардың құнын айтарлықтай төмендетуге, шалғай аудандарды қамтамасыз ету мәселесін шешуге және одан әрі коммерциялық өндіріске үлкен мүмкіндіктер әкелуі мүмкін.

Мисматч-спецификалық тимин-ДНҚ-гликозилазаның in vitro және in vivo әсерінен басталған ДНҚ күрделі зақымдануларының эксцизиялық репарациялаудың аберрантты жолын зерттеу (Тайпакова С.М., 2022-2024жж)

Бұл жобада биохимиялық және генетикалық тәсілдерді қолдана отырып, ДНҚ гликозилазаларымен басталған аберрантты BER жолына қатысатын механизмдерді молекулалық деңгейде ашуға және сипаттауға бағытталған.

Сонымен қатар, жасушаларда аберрантты репарация тудыруы мүмкін маңызды ДНҚ зақымдарын анықтау, қартаю және дегенеративті аурулармен байланысты экологиялық және генетикалық факторларды механикалық түсінуді қамтамасыз етеді, сондықтан жаңа профилактикалық және терапиялық стратегияларды жасауға көмектеседі.

Жоба мақсаты: 

Жобаның негізгі мақсаты – in vitro және in vivo мисматч-спецификалық тимин-ДНҚ гликозилазамен басталған аберрантты BER жолына қатысатын механизмдерді және тірі организмдерде өздігінен және зақымданған ДНҚ мутацияларының жинақталуын молекулалық деңгейде анықтау, сипаттау және аберрантты BER -дің физиологиялық рөлін бағалау

Жоба міндеті:

 1. In vitro жағдайында күрделі ДНҚ зақымданулары бар ДНҚ дуплекстеріне аберрантты BER жолын бастайтын адамның монофункционалды ДНҚ гликозилазасының TDG нақты биохимиялық сипаттамасы.

2. Тазартылған ДНҚ гликозилазамен аберрантты ДНҚ репарациясы талдауын in vitro қалпына келтіру. 

3. S. cerevisiae және E. coli штаммдарында адамның монофункционалды ДНҚ гликозилазасы TDG шамадан тыс экспрессияланатын генотоксикалық стреске жасушалық реакцияның сипаттамасы.

Алынған нәтижелер:

Құрамында тотыққан негіздер, аристолактам-аденин қосындылары, экзоциклді ДНҚ қосындылары және ДНҚ-ДНҚ айқаспалы байланыстары бар ДНҚ субстраттары синтезделді және тазартылды. Индукцияланатын T7 бактериофаг промоторының бақылауындағы hTDG генінің cDNA-сы бар рекомбинантты плазмида гендік инженерия әдістерін пайдалана отырып, N-терминусында 6xHis•тег тізбегімен құрастырылды, бұл металдар негізінде ақуыз өнімінің аффинділігін тазартуға мүмкіндік береді. хелат хроматографиясы. hTDG функционалды экспрессиясы E. coli Rosetta (DE3) штаммында жүзеге асырылды және металл-хелат хроматографиясы арқылы 6X His-терминусымен рекомбинантты hTDG ақуызын біртекті күйге дейін тазарту жүргізілді.hTDG функционалды экспрессиясы E. coli Rosetta (DE3) штаммында жүзеге асырылды және металл-хелат хроматографиясы арқылы 6X His-терминусымен рекомбинантты hTDG ақуызын біртекті күйге дейін тазарту жүргізілді. hTDG каталитикалық белсенді емес TDGN140A және гиперактивті TDGA145G және TDG H151Q нысандары сайтқа бағытталған мутагеназа арқылы жасалған. Мутацияланған hTDGN140A нуклеотидтер тізбегіндегі HCA үшін AAC алмастырылуы секвенирлеу арқылы расталды. Rosetta(DE3) штаммындағы 6xHis таңбаланған hTDG N140A функционалды экспрессиясы және ұқсастық хроматографиясы арқылы рекомбинантты белсенді емес hTDG N140A ақуызын біртекті тазарту жүргізілді. Адамның TDG субстрат ерекшелігі тотыққан негіздері бар олигонуклеотидті субстраттар, экзоциклді ДНҚ қосындылары және аристолактам-аденин қосындылары үшін сипатталды. Толық ұзындықтағы адамның TDG және TDG мысығы мен оның белсенді сайтының мутанттарының тотыққан негіздері бар олигонуклеотидті субстраттарға, экзоциклді ДНҚ қосындыларына, аристолактам-аденин қосындыларына және тізбек аралық және ішілік ДНҚ айқаспалы байланыстарына қарсы белсенділігін салыстыру бойынша жұмыс жүргізілуде.